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江蘇省《公共用紡織品安全技術規范》標準
添加時間:2016/04/09

前 言
  本標準第4章為強制性條款。為消除公共場所使用紡織品存在的衛生、質量的隱患,保障消費者的健康、衛生,規范公共場所使用紡織品的市場需求,制定本標準。

    本標準按GB / T1.1 —2000 《標準化工作導則第 1 部分:標準的結構和編寫規則》 編制。
    本標準附錄 A 、附錄 B 、附錄 C 、附錄 D 為規范性附錄,附錄 E 為資料性附錄。
    本標準由江蘇省纖維檢驗所(江蘇省紡織產品質量監督檢驗測試中心)提出。本標準由江蘇省纖維檢驗所(江蘇省紡織產品質量監督檢驗測試中心)、南京金龍紡實業有限公司、江蘇康乃馨織造有限公司、南通斯得福紡織裝飾有限公司起草。
    本標準主要起草人:李輝、石慶、魏長生、周觀林。

 

公共用紡織品安全技術規范
 


1 范圍
       本規范規定了公共用紡織品安全技術規范的術語和定義、要求、試驗方法。
       本規范適用于江蘇省境內公共場所用紡織品的要求。 
2 規范性引用文件
       下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件,其隨后所有的修改單(不包括勘誤的內容)或修訂版均不適用于本標準,然而,鼓勵根據本標準達成協議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本適用于本標準。 
       GB 251—1995 評定沾色用灰色樣卡 
       GB/T5455—1997 紡織品燃燒性能試驗垂直法 
       GB/T7573—2002 紡織品水萃取液 PH 值的測定 
       GB/T817—1987 數值修約規則
       GB18383 — 2007 絮用纖維制品通用技術要求
       GB 18401 — 2003 國家紡織產品基本安全技術規范
       FZ / T62006 —2004 毛巾
3 術語和定義
      下列術語和定義適用于本標準。 
3 . 1 公共用紡織品 linen supply 
      在公共場所,供不同的人,反復多次使用的紡織品,如:床上用品、毛巾類產品、服裝、餐廳用紡織品、窗簾等。
 3 . 2 醫療用公共用紡織品 hospital textiles
      醫療機構內使用的公共用紡織品,如:病房及疹療用紡織品、毛巾類產品、病員服等。 
3 . 3 非醫療用公共用紡織品hotel textiles
     不在醫療機構內使用的公共用紡織品。 
3 . 4 人體掉落物 body secretion
     從人身體上分泌、排泄、脫落的物質。 
4 要求 
4 . 1 分類
     公共用紡織品按使用類型分為為醫療用和非醫療用 2 類。
4 . 2 
     安全指標公共用紡織品安全指標見表 1 。


4 . 3 公共用紡織品中毛巾類產品、床單、被套、枕套、服裝不應經過抗菌、阻燃處理。
4 . 4 非醫療用公共用紡織品不應用醫療機構內部的洗滌設備進行洗滌;醫療用公共用紡織品不應
賓館、飯店等單位內部的洗滌設備進行洗滌;對外開展洗滌服務的公司,開展洗滌業務時,應分別處理醫療用公共用紡織品和非醫療用公共用紡織品(包括設備、環境、人員)。 
4 . 5 公共用紡織品中填充物應符合 GB18383 的規定。
5 試驗方法 
5 . 1 細菌、真菌 
5 . 1 . 1 取樣
       以無菌操作用滅菌生理鹽水或 PBS 濕潤 3 個無菌醫用棉拭子,并分別在3個 25cm2 (5cm×5cm)取樣處均勻涂抹三次,立即用滅菌剪刀剪去棉簽手接觸的部分,將3個棉拭子涂抹部分放入盛有30ml滅菌生理鹽水或 PBS 的容器中密封,每個容器為一份樣本,(1—5)℃ 保存, ( 4—6 ) h 內進行檢驗。將放有棉拭子的容器充分振搖,此液為 1 : 10 稀釋液。
 5 . 1 . 2 菌落總數
       按附錄 A 規定進行。
 5 . 1 . 3 大腸菌群
       按附錄 B 規定進行。
5 .1 . 4 致病菌
       按附錄 C 規定進行。
 5 .1 . 5 真菌總數
       按附錄 A 規定進行。 
5 . 2 萃取液pH值 
5 . 2 . 1 取樣
       樣品用0 . l mol / l 氯化鉀溶液(用蒸餾水或去離子水配制)室溫浸泡,浴比 1 : 50 ,浸泡時間為 1h 士 5min ,每10min 翻動一次,浸泡結束,取3份液樣進行檢測。 
5 .2 .2 檢驗方法
       按GB / T7573 規定進行。
5 . 3 異味
       按GB18401 —2003 中 6 . 7 規定進行,異味種類增加氯、汗、血腥等氣味。 
5 . 4 色污漬
       按GB251 規定進行。
5 . 5 人體掉落物
       按附錄 D 規定進行。 
5 . 6 吸水性
       按FZ / T62006—2004 中附錄 A 規定進行。
5 . 7 阻燃性
       按GB / T5455 規定進行。
       
       警告 ― 使用本標準微生物檢驗的人員應有微生物知識和正規實驗室工作的實踐經驗。本標準并未指出所有可能的安全問題。使用者有責任采取適當的安全和健康措施,并保證符合國家有關法規規定的條件。

附錄 A
     (規范性附錄)
     菌落總數檢驗方法


A . 1 細菌菌落總數檢驗方法
A . 1 . 1 以無菌(100 級)操作,吸取 1 : 10 稀釋液 2.0ml 檢樣,分別注入到兩個滅菌平皿內,每皿 1 . 0 ml 。當估計含菌量過高時(每平皿生長菌落數超過 300 個),可將采樣液作十倍遞增稀釋后再接種,即吸取1.0ml 加到9.0ml 滅菌生理鹽水中,混勻,此液為 1 : 100 稀釋液,每個稀釋度也做兩個平皿。 
A . 1 . 2 將已融化冷卻至 45 ℃ 左右的營養瓊脂培養基傾入平皿,每皿約(15一20 ) ml ,并輕輕旋搖平皿,使樣液混勻,待培養基凝固后,翻轉平皿使底向上,置于(36士1)℃ 培養箱培養 48h 。 
A . 2 菌落數計算
       作平皿菌落計數時,可用肉眼直接觀察,必要時用放大鏡檢查以防遺漏,在記下各平皿的菌落數后,求出同一稀釋度各平皿生長的平均菌落數。若平皿中有連成片狀的菌落,該平皿不計數;若片狀菌不到平皿中的一半,而其余一半中菌落分布均勻,則可將此半個平皿菌落計數后乘以 2 ,所得結果代表全皿菌落數。
       菌落總數按公式(A .1)計算:
       M=k×n……………………………………………………………………………… ( A . l ) 
       式中:m—— 細菌菌落總數, cfu / 25cm2;
                  k —— 稀釋倍數;
                  n —— 平均菌落數。
A . 3 菌落計數報告
A . 3 . 1 選擇平均菌落數在30—300之間的稀釋度,乘以稀釋倍數計數(見表A.1中例1)。
A .3 . 2 若有兩個稀釋度的平均菌落數均在 30—300 之間,則由兩菌落總數之比值來決定,若其比值小于或等于2 ,應報告平均數,若大于2 ,則報告其中稀釋度較低的平皿菌落數(見表A .1中例2 、例3)。 
A . 3 . 3 若所有稀釋度的平均菌落數均大于300 , 則應按稀釋度最高的平均菌落數乘以稀釋倍數報告(見表A .1中例4)。 
A . 3 . 4 若所有稀釋度的平均菌落數均小于30 ,則應按稀釋度最低的平均菌落數乘以稀釋倍數報告(見表A , 1中例5)。 
A . 3 . 5 若所有稀釋度平均菌落數均不在 30 —300 之間,其中一個稀釋度平均菌落數大于 300 ,而相鄰的另一個稀釋度平均菌落數小于 30 ,則以接近 30 或300 的平均菌落數乘以稀釋倍數報告(見表A .l中例 6)。 
A . 3 . 6 若所有的稀釋度都無菌生長,報告數為小于1 cfu / 25cm2(見表A.1中例7 )。 
A . 3 . 7 菌落計數報告,菌落數在 100 以內時,按實際數值報告,大于等于 100 時,采用二位有效數字,按GB / TS 170《 數值修約規則》標準進行舍取,可用科學計數法進行表示(見表A .1中報告方式欄)。在報告菌落數為“不可計”時,應注明樣品的稀釋度。
A . 4 真菌菌落總數檢測方法
       真菌的檢測程序與細菌檢測操作程序基本相同,主要區別在于所用培養基、間不同。真菌培養用沙堡氏瓊脂培養基,培養溫度(25士l )℃ ,培養時間為5d 。要隨意打開培養皿的蓋,以防止真菌袍子四處飛揚污染實驗環境。培養溫度、培養時計數菌落數時,不要隨意打開培養皿的蓋,以防止真菌孢子四處飛揚污染實驗環境。

 

附錄B
     (規范性附錄)
     大腸菌群檢驗方法


B . 1 操作步驟
        以無菌(100 級)操作,取1:10 稀釋液 5ml 接種于50ml乳糖膽鹽發酵管,置(36士1 ) ℃培養24h , 如不產酸也不產氣,則報告為大腸菌群陰性。
        如產酸產氣,則劃線接種伊紅美藍瓊脂平板,置(36士l)℃ 培養(18—24 ) h ,觀察平板上菌落形態。典型的大腸菌落為黑紫色或紅紫色,圓形,邊緣整齊,表面光滑濕潤,常具有金屬光澤,也有的呈紫黑色,不帶或略帶金屬光澤,或粉紅色,中心較深的菌落。
取疑似菌落 1—2 個作革蘭氏染色鏡檢,同時接種乳糖發酵管,置(36士l)℃ 培養 24h ,觀察產氣情況。
B . 2 結果報告
       凡乳糖膽鹽發酵管產酸產氣,,乳糖發酵管產酸產氣,在伊紅美藍平板上有典型大腸菌落,革蘭氏染色為陰性無芽胞桿菌,可報告被檢樣品檢出大腸菌群。

附錄 C
     (規范性附錄)
     致病菌檢驗方法


C . 1 綠膿桿菌檢測方法
C . 1 . 1 操作步驟
       以無菌(100 級)操作,取1 : 10 稀釋液 5ml ,加入到 50ml SCDLP 培養液中,充分混勻,置(36士1 ) ℃ 培養(18—24 ) h 。如有綠膿桿菌生長,培養液表面呈現一層薄菌膜。培養液常呈黃綠色或藍綠色。從培養液的薄菌膜處挑取培養物,劃線接種十六烷三甲基溴化銨瓊脂平板,置(36士l)℃ 培養(18—24 ) h ,觀察菌落特征。銅綠假單胞菌在此培養基上生長良好,菌落扁平,邊緣不整,光滑濕潤,呈灰白色,菌落周圍培養基常擴散有水溶性色素。此培養基選擇性強,大腸桿菌不能生長,革蘭氏陽性菌生長較差。在缺乏十六烷三甲基溴化銨瓊脂時也可用乙酰胺培養基進行分離,從培養液的薄菌膜處挑取培養物,劃線接種于乙酰胺瓊脂平板,置(36士l)℃ 培養(18—24 ) h ,觀察菌落特征。銅綠假單胞菌在此培養基上生長良好,菌落扁平,邊緣不整,菌落周圍培養基略帶粉紅色,其他菌不生長。
       取可疑菌落涂片作革蘭氏染色,鏡檢為革蘭氏陰性菌者應進行下列試驗:
       氧化酶試驗:取一小塊潔凈的白色濾紙片放在滅菌平皿內,用無菌玻璃棒挑取可疑菌落涂在濾紙片上,然后在其上滴加一滴新配制的l%二甲基對苯二胺試液,(15—30 ) s 內出現粉紅色或紫紅色,為氧化酶試驗陽性,不變色者為陰性。
       綠膿菌素試驗:取2—3個可疑菌落,分別接種在綠膿菌素測定用培養基( PDP )斜面, ( 36 士 l ) ℃ 培養( 20 — 24 ) h ,加入氯仿(************)(3—5 ) ml ,充分振蕩使培養物中可能存在的綠膿菌素溶解于氯仿液內,待氯仿(************)提取液呈藍色時,用吸管將氯仿移到另一試管中并加入 1mol / l 的鹽酸 1ml ,振蕩后靜置片刻。如上層出現粉紅色或紫紅色即為陽性,表示被檢物中有綠膿菌素存在。
       硝酸鹽還原產氣試驗:挑取被檢菌落純培養物接種在硝酸鹽胨水培養基中,置(36士l)℃ 培養24h ,硝酸鹽胨水培養基的小倒管中有氣體者即為陽性。表明該菌能還原硝酸鹽,并將亞硝酸鹽分解產生氮氣。
       明膠液化試驗:取可疑菌落純培養物,穿刺接種在明膠培養基內,置(36士1)℃ 培養 24h,取出放于(4—10 )℃ 冰箱30min ,如仍呈溶解狀液態為陽性,凝固不溶者為陰性。 
       42 ℃ 生長試驗:取可疑培養物,接種在普通瓊脂斜面培養基上,置(41—42 )℃ 培養箱中培養(24一48 ) h ,有綠膿桿菌生長為陽性。 
C . 1 . 2 結果報告
       被檢樣品經增菌分離培養后,證實為革蘭氏陰性桿菌,氧化酶及綠膿桿菌試驗為陽性者,即可報告為被檢樣品中檢出綠膿桿菌。當綠膿菌素試驗為陰性時,但液化明膠試驗、硝酸鹽還原產氣試驗和42 ℃生長試驗三者皆為陽性時,仍可報告被檢樣品中檢出綠膿桿菌。 
C . 2 金黃色葡萄球菌檢測方法 
C . 2 . 1 操作步驟
       以無菌(100 級)操作,取 l : 10 稀釋液 5ml ,加入到 50mLSCDLP 培養液中,充分混勻,置(36士l ) ℃培養24h 。
       自上述增菌液中取1—2 接種環,劃線接種在 Baird Parker 氏培養基,如無此培養基,也可劃線接種在血瓊脂培養基上,置(36士1)℃ 培養(24一48 ) h 。在血瓊脂平板上該菌落呈金黃色,大而突起,圓形,不透明,表面光滑,周圍有溶血圈。在Baird Parker 氏培養基上為圓形,光滑,濕潤,菌落直徑為(2—3 )mm ,顏色呈灰色至黑色,邊緣為淡色,周圍為一混濁帶,在其外層有一透明帶。
       染色鏡檢:挑取典型菌落,涂片作革蘭氏染色鏡檢,金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽性球菌,排列成葡萄狀,無芽孢與夾膜,直徑為(0 . 5—1 . 0)μm。鏡檢符合上述情況,應進行下列試驗:
       甘露醇發酵試驗:取上述菌落接種甘露醇培養液,置(36士l)℃ 培養 24h ,發酵甘露醇產酸者為陽性。
       血漿凝固酶試驗:
       波片法:取清潔干燥載玻片,一端滴加一滴生理鹽水,另一端滴加一滴兔血漿,挑取菌落分別與生理鹽水和血漿充分研磨混合,血漿與菌苔混懸液在5min 內出現團塊或顆粒狀凝塊時,而鹽水滴仍呈均勻混濁無凝固現象為陽性,如兩者均無凝固現象為陰性。凡玻片試驗呈陰性反應或鹽水滴與血漿均有凝固現象,再進行試管凝固酶試驗。
       試管法:吸取1:4 新鮮血漿0 .5ml ,放入滅菌小試管中,再加入待檢菌24h 肉湯培養物0 .5ml 。混勻,放(36士1)℃ 培養箱或水浴中,每30min觀察一次,24h之內呈現凝塊即為陽性。同時以已知血漿凝固酶陽性和陰性菌株肉湯培養物各0 .5ml 作為陽性與陰性對照。 
C . 2 . 2 結果報告
       凡在瓊脂平板上有可疑菌落生長,鏡檢為革蘭氏陽性葡萄球菌,并能發酵甘露醇產酸,血漿凝固酶試驗為陽性者,可報告被檢樣品檢出金黃色葡萄球菌。 
C . 3 溶血性鏈球菌檢測方法 
C . 3 . 1 操作步驟
       以無菌( 100 級)操作,取 1 : 10 稀釋液 5ml 加入到50ml葡萄糖肉湯中,置于(36 士 l )℃ 培養 24h 。
將培養物劃線接種于血瓊脂平板,( 36士1)℃培養24h 觀察菌落特征。溶血性鏈球菌在血平板上為灰白色,半透明或不透明,針尖狀突起,表面光滑,邊緣整齊,周圍有無色透明溶血圈。
       染色鏡檢:挑取典型菌落作涂片革蘭氏染色鏡檢,應為革蘭氏陽性,呈鏈狀排列的球菌。鏡檢符合上述情況,應進行下列試驗:
       鏈激酶試驗:吸取草酸鉀血漿 0.2ml ( 0 . 01g 草酸鉀加5ml兔血漿混勻,經離心沉淀,吸取上清液),加入0.8ml 滅菌生理鹽水,混勻后再加入待檢菌 24h 肉湯培養物0 .5ml和0.25%氯化鈣0 .25ml , 混勻,放(36士l)℃ 水浴中,2min 觀察一次(一般 10min 內可凝固),待血漿凝固后繼續觀察并記錄熔化時間。如 2h 內不熔化,繼續放置 24h 觀察,如凝塊全部熔化為陽性,24h仍不熔化為陰性。
       桿菌肽敏感試驗:將被檢菌落液涂于血平板上,用滅菌鑷子取每片含0.04單位桿菌肽的紙片放在平板表面上,同時以己知陽性菌株作對照,在(36士2)℃ 下放置(18—24 ) h ,有抑菌帶者為陽性。 
C . 3 . 1 結果報告
       鏡檢革蘭氏陽性鏈狀排列球菌,血平板上呈現溶血圈,鏈激酶和桿菌肽試驗陽性,可報告被檢樣品檢出溶血性鏈球菌。

附錄 D
     (規范性附錄)
     人體掉落物檢驗方法


D . 1 原理
      以人眼感觀檢測樣品上是否有毛發、皮屑、體液、污漬等。 
D. 2 試驗條件
     檢測人員應先洗臉、洗手,并將頭發、手、臂等密封起來,以防自身污染影響檢測結果。
D. 3 樣品
毛巾類用品、服裝等可以是擺放好待用的,也可以是擺放前成包的;床上用品應該是擺放好待用的。
D. 4 方法
現場以人眼感觀檢驗為主,需要時可輔以(l—2)倍的放大鏡、尖嘴鑷子檢測是否有毛發、皮屑、體液、污漬等,對最大尺寸小于1.0mm的物體不予以判斷,檢測到的物質應收集、密封保存。

附錄 E
     (資料性附錄)
     培養基與試劑制備


E.1 營養瓊脂培養基
成分:
蛋白胨                        10.0g 
牛肉膏                        3.0g
氯化鈉                        5.0g 
瓊脂                          15g—20g
蒸餾水                        I000ml 
       制法:除瓊脂外其他成分溶解于蒸餾水中,調pH至7.2—7.4,加入瓊脂,加熱溶解,分裝試管,121 ℃ 高壓滅菌 20min 后備用。 
E.2 乳糖膽鹽發酵管
成分:
蛋白胨                                    20.0g 
豬膽鹽(或牛、羊膽鹽)                    5.0g
乳糖                                      10.0g
0.04%溴甲酚紫水溶液                      25ml 
蒸餾水                                    加至1000ml 
       制法:將蛋白胨、膽鹽及乳糖溶于水中,校正pH至7.4,加入指示劑,分裝每管 50ml ,并放入一個小倒管, 115℃ 高壓滅菌15min后備用。
E.3 乳糖發酵管
成分:
蛋白胨                                     20.0g
乳糖                                       10.0g
 0 . 04 %溴甲酚紫水溶液                   25 ml
蒸餾水                                     加至1000ml 
       制法:將蛋白胨及乳糖溶于水中,校正pH至7.4 ,加入指示劑,分裝每管 10ml ,并放入一個小倒管, 115 ℃高壓滅菌15min后備用。 
E.4伊紅美藍瓊脂(EMB ) 
成分:
蛋白胨                                     20.0g 
乳糖                                       10.0g
磷酸氫二鉀                                 2.0g
瓊脂                                       15g 一 20g
2 %伊紅 Y溶液                             20ml
0.65 %美藍溶液                            10ml 
蒸餾水                                     加至 1000ml 
       制法:將蛋白胨、磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中,校正pH至7.1,分裝于燒瓶內,121 ℃ 高壓滅菌 15min 備用,臨用時并加熱溶化瓊脂加入乳糖(過濾滅菌),冷至 55 ℃ ,加入伊紅和美藍溶液搖勻,傾注平板。
E.5SCDLP 液體培養基
成分:
酪蛋白胨                                   17 . 0g
大豆蛋白胨                                 3 . 0g 
氯化鈉                                     5 . 0g 
磷酸氫二鉀                                 2 . 5g
葡萄糖                                     2 . 5g
卵磷脂                                     1 . 0g
吐溫 80                                    7 . 0g
蒸餾水                                     1000ml
      制法:將各種成分混合(如無酪蛋白胨和大豆蛋白胨也可用日本多價胨代替),加熱溶解,調pH 至7.2 — 7.3 ,分裝, 121 ℃ 高壓滅菌 20min ,搖勻,避免吐溫80沉于底部,冷至 25 ℃ 后使用。
E.6十六烷三甲基溴化銨培養液
成分:
牛肉膏                                      3 . 0g 
蛋白胨                                      10.0g
氯化鈉                                      5 . 0g
十六烷三甲溴銨 0.3g瓊脂        15g —20g 
蒸餾水                                      1000ml 
       制法:除瓊脂外,上述各成分混合加熱溶解,調pH 至 7.4 一 7.6 ,然后加入瓊脂, 115℃ 高壓滅菌 20min ,冷至 55 ℃ 左右,傾注平皿。
E.7 乙酰胺培養基
成分:
乙酰胺                                      10.0g
氯化鈉                                      5.0g
無水磷酸氫二鉀                              1.39g
無水磷酸二氫鉀                              0.73g
硫酸鎂( MgSO 4? 7H2O )       0.5g
酚紅                                         0.012g
瓊脂                                         15g一 20g
蒸餾水                                       1000ml 
       制法:除瓊脂和酚紅外,將其他成分加到蒸餾水中,加熱溶解,調pH 至 7.2—7.4,然后加入瓊脂和酚紅,121 ℃ 高壓滅菌 20min 后,制成平板備用。
E.8 綠膿菌素測定用培養基斜面
成分:
蛋白胨                                      20.0g
氯化鎂                                      1 . 4g
硫酸鉀                                      10 . 0g
瓊脂                                        15g—20g
甘油(化學純)                              10.0g 
蒸餾水                                     加至1000ml 
       制法:將蛋白胨、氯化鎂和硫酸鉀加到蒸餾水中,加熱溶解,調pH 至7.4,加入瓊脂和甘油,加熱溶解,分裝試管,l15 ℃高壓滅菌20min ,制成斜面備用。
E.9 明膠培養基
成分:
牛肉膏                                      3.0g 
蛋白胨                                      5.0g
明膠                                        120g 
蒸餾水                                      1000ml 
       制法:各成分加入蒸餾水中浸泡20min ,加熱攪拌溶解,調pH 至7.4, 5ml分裝于試管中, 115 ℃高壓滅菌20min ,直立制成高層備用。
E.10 硝酸鹽蛋白胨水培養基
成分:
蛋白胨                                     10.0g
酵母浸膏                                  3.0g
*********                                     12.0g
亞硝酸鈉                                  0.5g
蒸餾水                                     1000ml
       制法:將蛋白胨與酵母浸膏加到蒸餾水中,加熱溶解,調pH至7.2,煮沸過濾后補足液量,加入硝酸鉀和亞硝酸鈉溶解均勻,分裝到加有小倒管的試管中,115 ℃高壓滅菌20min 備用。 
E.11 Baird Parker 培養基
成分:
胰蛋白胨                                  10.0g
牛肉膏                                    5.0g
酵母浸膏                                  1.0g
丙酮酸鈉                                  10.0g
甘氨酸                                    12.0g
氯化鋰( LiC1 ? 6HzO )           5.0g 
瓊脂                                       20g
蒸餾水                                     1000ml 
      增菌劑的配制: 30% 卵黃鹽水50ml 與除菌過濾的1%亞碲酸鉀溶液10ml 混合,保存于冰箱內備用。
      制法:將各成分加到蒸餾水中,加熱煮沸完全溶解,冷至25 ℃調pH7.2。 分裝每瓶95ml , 121 ℃ 高壓滅菌20min 后備用。臨用時加熱溶化瓊脂,每95ml加入預熱至50 ℃ 的卵黃亞碲酸鉀增菌劑 5ml ,搖勻后傾注平板。培養基應是致密不透明的,使用前在冰箱儲存不得超過18h。 
E.12 血瓊脂培養基
成分:
營養瓊脂                                 100ml 
脫纖維羊血(或兔血)             10ml 
       制法:將滅菌后的營養瓊脂加熱溶化,涼至55 ℃ 左右,用無菌方法將10ml脫纖維血加入后搖勻,傾注平皿置冰箱備用。
E.13 甘露醇發酵培養基
成分:
蛋白胨                                     10.0g
牛肉膏                                     5.0g
氯化鈉                                     5.0g
甘露醇                                     10.0g
0.2%溴麝香草酚藍溶液           12ml 
蒸餾水                                     1000ml 
       制法:將蛋白胨、氯化鈉、牛肉膏加到蒸餾水中,加熱溶解,調pH至7.4,加入甘露醇和溴麝香草酚藍混勻后,分裝試管,115℃高壓滅菌20min備用。
E.14 葡萄糖肉湯
成分:
蛋白胨                                    10.0g
牛肉膏                                    5.0g
氯化鈉                                    5.0g
葡萄糖                                    10.0g
蒸餾水                                    1000ml 
       制法:上述成分溶于蒸餾水中,調pH 至 7.2—7.4 ,加熱溶解,分裝試管,121℃高壓滅菌15min后備用。 
E.15 兔血槳
       制法:取滅菌3.8%檸檬酸鈉1份,兔全血4份,混勻靜置,3000r / min 離心5min ,取上清,棄血球。 
E.16 沙堡氏瓊脂培養基
成分:
蛋白胨                                   10.0g 
葡萄糖                                   40.0g
瓊脂                                      15g —20g
蒸餾水                                   1000ml 
       制法:用700ml 蒸餾水將瓊脂溶解,300ml蒸餾水將葡萄糖與蛋白胨溶解,混合上述兩部分,搖勻后分裝,l15℃高壓滅菌15min備用。使用前,用過濾除菌方法加入 0.1g/l 的氯霉素或者 0.03g/l的鏈霉素。
       定性試驗采用沙氏培養液,除不加瓊脂外其他成分與制法同上。 
E.17 營養肉湯培養液
成分:
蛋白胨                                   10.0g
氯化鈉                                   5.0g 
牛肉膏                                   3.0g
蒸餾水                                   1000ml 
       制法:調節pH 至7.2—7.4,分裝, 115℃高壓滅菌20min備用。 
E.18 澳甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養基
成分:
蛋白胨                                  10.0g
葡萄糖                                  5.0g
蒸餾水                                  1000ml 
       制法:調節pH至7.0—7.2 ,加2%溴甲酚紫酒精溶液0.6ml , 115℃高壓滅菌20min備用。 
E.19 革蘭氏染色液
結晶紫染色液:
結晶紫                                 1.0g
95%乙醇                               20ml 
1%草酸銨水溶液                        80ml 
       將結晶紫溶解于乙醇中,然后與草酸銨溶液混合。
革蘭氏碘液
碘                                       1.0g
碘化鉀                                   2.0g
蒸餾水                                   300ml 
脫色劑 
95 %乙醇
復染液: 
(1) 沙黃復染液:
沙黃                                   0.25g
95%乙醇                               10ml 
蒸餾水                                 90ml 
       將沙黃溶解于乙醇中,然后用蒸餾水稀釋。
(2) 稀石炭酸復紅液:
       稱取堿性復紅10g ,研細,加95%乙醇100ml ,放置過夜,濾紙過濾。取該液10ml,加5%石炭酸水溶液90ml混合,即為石炭酸復紅液。再取此液10ml ,加水90ml ,即為稀石炭酸復紅液。
 E.20 0.03mol / L 磷酸鹽緩沖液(PBS , pH7.2) 
成分:
磷酸氫二鈉                                2.83g
磷酸二氫鉀                                1.36g
蒸餾水                                    1000ml



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